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渐渐习惯了现代生活的美国队长史蒂夫·罗杰斯（克里斯·埃文斯 Chris Evans 饰），在一次行动后隐隐嗅到神盾局内部所弥漫出来的凶险气味。而当得知神盾局正秘密进行的“洞察计划”后，他更为此感到愤怒。某天，神盾局指挥官尼克-法瑞（塞缪尔·杰克逊 Samuel L. Jackson 饰）遭到一群武装分子袭击，他拼尽全力将一支U盘交到美国队长手中，这里面藏着该局二战以来最重要且最可怕的秘密。在此之后，美国队长因涉嫌杀害尼克而遭到前局长亚历山大·皮尔斯（罗伯特·雷德福/Robert Redford 饰）的通缉和追杀，逃亡中他得到黑寡妇（斯嘉丽·约翰逊 Scarlett Johansson 饰）和退伍老兵“猎鹰”（安东尼·麦凯 Anthony Mackie 饰）的帮助。 他们必须争分夺秒解开神盾局的秘密，阻止“洞察计划”的施行……
由克里斯·埃文斯,斯嘉丽·约翰逊,塞巴斯蒂安·斯坦,安东尼·麦凯,塞缪尔·杰克逊,罗伯特·雷德福,寇碧·史莫德斯,弗兰克·格里罗,马克斯米利亚诺·赫尔南德斯,艾米丽·万凯普,海莉·阿特维尔,托比·琼斯,斯坦·李,卡兰·马尔韦,珍妮·艾加特,伯纳德·怀特,阿兰·戴尔,黄经汉,盖瑞·山德林,乔治·圣皮埃尔,萨尔瓦托雷·哈雷布,扎克·杜哈梅,阿德托库姆布斯·麦克马克,亚伦·希梅尔斯坦,乔·罗素,克里斯托弗·马库斯,斯蒂芬·麦克菲利,帕特·希利,爱德·布鲁贝克,D·C·皮尔森,丹尼·朴迪,伯纳德·兹林斯卡斯,布兰卡等主演。